中国小麦花叶病毒弱毒突变体筛选与鉴定

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中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)是我国小麦土传花叶病毒病的重要病原.将CWMV RNA1、RNA2片段分别连接到pCB301-Rz载体,得到重组质粒pCWMV-RNA1和pCWMV-RNA2,这2个质粒可在本氏烟上引起花叶和畸形症状,在小麦上引起黄花叶症状.在pCWMV-RNA2富含半胱氨酸蛋白基因的5'-端融合绿色荧光蛋白基因,可在本氏烟上系统产生绿色荧光.将RNA1 RdRp第1001位Asp(D1001)和RNA2 CP第127位Glu(E127)的密码子替换为丙氨酸Ala(A)密码子,获得突变体CWMV-RdRp-D1001A、CWMV-CP-E127A、CWMV-RdRp-D1001A/CP-E127A.与野生型CWMV相比,这3个突变体在本氏烟中致病力显著下降,积累量显著降低.
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