分时同步循环半定量RT-PCR检测胃癌细胞E-钙粘附素表达的方法学建立

来源 :中国肿瘤临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chchang

【摘要】

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目的：探索建立分时同步循环法分管半定量RT-PCR体系，并检测不同分化程度胃癌细胞中E-钙粘附素的相对表达量。方法：以胃癌细胞株HGC-27、MKN45、SCG-790为标本，抽提总RNA．合成第一

【作者】

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蔡诚忠许洪卫谭龙益

【机构】

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上海市第十人民医院普通外科,第二军医大学附属长征医院实验诊断科病毒和分子生物学专业组

【出处】

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中国肿瘤临床

【发表日期】

：

2006年8期

【关键词】

：

分时同步循环法分管半定量RT-PCR 胃癌 E-钙粘附素 Time-sharing synchronized circulation Semiquantitat

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目的：探索建立分时同步循环法分管半定量RT-PCR体系，并检测不同分化程度胃癌细胞中E-钙粘附素的相对表达量。方法：以胃癌细胞株HGC-27、MKN45、SCG-790为标本，抽提总RNA．合成第一链cDNA．优化PCR反应条件，建立分时同步循环法分管半定量RT-PCR反应体系，检测比较E-Cad的相对表达量。结果：采用LoTempPCR全息反应液优化，退火温度为85℃，循环数为33，分时同步循环数为8．检测得胃癌细胞的E-Cad表达量与分化程度成负相关，符合试验预期。结论：分时同步循环法分管半定量RT-

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