【摘 要】
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目的 探讨miR-21对人髓母细胞瘤DAOY细胞增殖和凋亡的影响.方法 人髓母细胞瘤DAOY细胞分为实验组、对照组和空白组.空白组不进行转染,加入等量DMEM培养基;对照组加入无义序列
【机 构】
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唐山市丰润区人民医院儿科,河北唐山064000唐山市丰润区第二人民医院儿科,河北唐山064000;
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目的 探讨miR-21对人髓母细胞瘤DAOY细胞增殖和凋亡的影响.方法 人髓母细胞瘤DAOY细胞分为实验组、对照组和空白组.空白组不进行转染,加入等量DMEM培养基;对照组加入无义序列/脂质体复合物;实验组加入miR-21 inhibitor脂质体复合物.3组细胞采用实时荧光定量PCR法检测miR-21和PRDX3 mRNA表达水平,采用Western blot法检测miR-21和PRDX3蛋白相对表达量,采用CCK-8法检测细胞增殖率,采用AnnexinV-FITC法检测细胞凋亡率,应用流式细胞仪检测细胞内活性氧水平.结果 转染24、48 h后,实验组细胞miR-21、PRDX3 mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组和空白组(P＜0.05),对照组与空白组比较差异无统计学意义(P＞0.05);转染24、48 h后,实验组细胞增殖率[(4.20±0.29)％、(8.20±4.39)％]明显低于空白组[(48.19±0.42)％、(80.09±0.55)％]和对照组[(45.22±1.02)％、(78.28±1.04)％](P＜0.05),细胞凋亡率[(7.17±0.21)％、(11.40±0.26)％]、细胞平均荧光强度(189.33±45.39、192.40±50.88)明显高于空白组[((3.20±0.26)％、(3.07±0.31)％,168.09±39.42、160.87±41.44)]和对照组[(3.47±0.32)％、(4.20±0.44)％,172.49±44.92、165.20±40.61] (P＜0.05),空白组细胞增殖率、细胞凋亡率及细胞平均荧光强度与对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 抑制miR-21的表达可降低人髓母细胞瘤PRDX3的表达水平,促使细胞内活性氧水平增加,从而抑制细胞增殖与促进细胞凋亡.
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