【摘 要】
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目的：构建针对肿瘤增殖基因Ki67的小干扰RNA（Ki67-siRNA）腺病毒表达载体,体外研究其对人结肠癌细胞株SW620细胞生长影响,为结肠癌的基因治疗提供参考。方法：设计可形成小发夹结构
【基金项目】
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国家自然科学基金（编号：30570385）和卫生部科研基金资助（编号：WKJ2005-2-026）.
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目的：构建针对肿瘤增殖基因Ki67的小干扰RNA（Ki67-siRNA）腺病毒表达载体,体外研究其对人结肠癌细胞株SW620细胞生长影响,为结肠癌的基因治疗提供参考。方法：设计可形成小发夹结构的Ki67-siRNA对应模板DNA序列,克隆至缺陷型腺病毒质粒pCA13,构建Ki67-siRNA表达质粒pCA13-Ki67。鉴定正确后,将pCA13-Ki67与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染至293细胞,包装成复制缺陷型腺病毒Ad-Ki67。大量扩增Ad-Ki67,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度。Ad-
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