【摘 要】
：
HIV感染引起的AIDS已经成为严重影响人类健康和社会发展的全球性疾病.酶联免疫吸附试验和免疫印迹检验组合则被认为是HIV检测的"金标准".构建了gp160的抗原多表位融合基因及
【机 构】
：
三峡大学分子生物学研究所,湖北省宜昌市疾病预防控制中心,三峡大学医学院
论文部分内容阅读
HIV感染引起的AIDS已经成为严重影响人类健康和社会发展的全球性疾病.酶联免疫吸附试验和免疫印迹检验组合则被认为是HIV检测的"金标准".构建了gp160的抗原多表位融合基因及在原核系统的高表达, 为HIV抗体测定提供特异、价廉的抗原.选定HIV-1 gp160基因中3个片段包含较多抗原表位的区域, 设计带有酶切位点的引物,用PCR的方法从HIV-1HXB2全基因扩增编码这3个片段的基因序列,通过质粒提取、酶切、测序方法鉴定基因片段的正确性, SDS-PAGE和Western blot测定融合蛋白的抗原特异性.构建的HIV-1 gp160多表位嵌合基因的原核表达质粒,酶切和测序结果表明基因序列正确,基因全长969bp.在大肠杆菌BL21(DE3) 中高效表达的重组蛋白分子量为37kDa,以包涵体的形式存在.应用Western blot测定10例正常人和12例HIV/AIDS病人血浆显示HIV-1 gp160多表位融合蛋白具有良好的抗原特异性.成功构建了高表达 HIV-1 gp160多表位蛋白的原核表达系统,纯化的融合蛋白有较强的抗原特异性.
其他文献
目的 探讨大气污染物对大鼠肺特异性蛋白的影响.方法 96只Wistar大鼠,随机分为3个实验组(低、中、高剂量)和1个对照组,分别观察1、15、30d,每组8只,乙醚麻醉下进行气管注入染
目的 探讨肿瘤直径＞5 cm的周围型肺癌行全胸腔镜肺叶切除手术的可行性.方法 回顾性分析2009年7月～2012年4月全胸腔镜下肺叶切除术治疗周围型肺癌145例,其中肿瘤最大直径＞5 cm21
对餐厨垃圾中的细菌进行分离,通过定性初筛和定量复筛,从202株细菌中筛到对餐厨垃圾中淀粉、蛋白质、纤维素、油脂均有明显降解能力的活性菌4株.采用分子生物学方法对4株菌进
目的:探讨观察神经干细胞(NSCs)移植到大鼠损伤脊髓(SCI)后迁徙情况的方法.方法:体外培养大鼠NSCs,应用超顺磁性氧化铁(super paramagnetic iron oxide,SPIO)及多聚左旋赖氨
参照GenBank发表的猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus type 2,PCV2)序列,设计合成了1对用于扩增PCV2全长基因组的特异性引物,从患断奶后仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)的病料中,
采用常规生测方法和酶活力测定方法,初步研究了辣椒碱对小菜蛾Plutella xylostella L.的产卵忌避和拒食作用,及其对小菜蛾体内谷胱甘肽-S-转移酶、Na+,K+-ATP酶活性的影响,以
目的：观察平艾合剂干预对HIV/AIDS患者的临床疗效，阐明中药应用于艾滋病治疗的特点。方法：选择符合纳入标准的41例HIV/AIDS患者，给予相应的平艾合剂方治疗，3个月为1疗程，治疗2个疗
成都大熊猫繁育研究基地对圈养的7只8～21岁的大熊猫血清犬瘟热病毒(CDV)中和抗体滴度进行了测定.结果显示,尽管这些大熊猫自2003年起每年接受2次CDV弱毒疫苗接种,该弱毒疫苗是
Notch信号转导通路在细胞和组织的发展过程中起重要作用,主要通过与其配体的结合介导细胞间的信号传递.越来越多的证据表明Notch信号转导异常会导致很多系统疾病的发生,尤其
目的 研究细胞外三磷酸腺苷(ATP)对大鼠脊髓损伤后胶质纤维酸性蛋白(GFAF)表达和运动功能恢复的影响.方法 健康成年Wistar大鼠66只按照随机数字表法取6只作为正常对照组,余60