副流感病毒5型SH蛋白单克隆抗体的制备

来源 :中国兽药杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jq1983wyh
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为获得副流感病毒5型SH蛋白的单克隆抗体,将构建的重组表达质粒pET43 a-SH转化BL21(DE3)plys,经IPTG诱导表达、过镍柱纯化后将重组蛋白作为免疫原,免疫8周龄Balb/c雌性小鼠,并按常规方法制备杂交瘤细胞.通过间接免疫荧光方法进行筛选,获得3株杂交瘤细胞株,命名为5 B9、3 G8、4 E11,并进行了培养特性、分泌抗体活性、分泌抗体亚类的鉴定.结果显示:3株细胞株连续传代10代均稳定分泌单克隆抗体,细胞上清液IFA效价稳定,分泌单克隆抗体亚型均为IgG2a.制备并纯化了1株(5B9)单克隆抗体,浓度为4.26 mg/mL,纯度不低于90%,IFA效价不低于1:2000,与猪牛等常见病毒均无交叉反应.
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