【摘 要】
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目的:采用网络药理学和实验验证的方法探究血尿胶囊治疗急性肾盂肾炎(APN)的作用机制.方法:通过APN大鼠模型研究血尿胶囊对APN的作用效果.使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),化学专业数据库,中医证候关联(SymMap)数据库检索菝葜、薏苡仁、棕榈子的化学成分,PharmMapper与SwissTargetPrediction数据库收集成分的靶点信息,使用治疗靶标数据库(TTD),DrugBank数据库,疾病相关的基因与突变位点数据库(DisGeNET),GeneCards数据库,在线人类
【机 构】
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山西省中医药研究院方剂研究所,太原030012;山西中医药大学中药与食品工程学院,太原030012;山西省中医药大学附属医院,太原030012
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目的:采用网络药理学和实验验证的方法探究血尿胶囊治疗急性肾盂肾炎(APN)的作用机制.方法:通过APN大鼠模型研究血尿胶囊对APN的作用效果.使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),化学专业数据库,中医证候关联(SymMap)数据库检索菝葜、薏苡仁、棕榈子的化学成分,PharmMapper与SwissTargetPrediction数据库收集成分的靶点信息,使用治疗靶标数据库(TTD),DrugBank数据库,疾病相关的基因与突变位点数据库(DisGeNET),GeneCards数据库,在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)收集疾病靶点信息.使用基因注释工具(Metascap)对血尿胶囊治疗APN的关键基因进行基因本体(GO)富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.使用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)与蛋白免疫印迹法对预测结果进行验证.结果:与空白组和假手术组比较,模型组左右肾比值升高,脏器指数升高(P＜0.05,P＜0.01),白细胞(WBC),中性粒细胞(NEUT),单核细胞(MONO),淋巴细胞(LY)水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01),核转录因子-κB(NF-κB),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,诺氟沙星组左右肾比值降低,脏器指数降低(P＜0.05,P＜0.01),WBC,NEUT,MONO,LY水平降低(P＜0.05,P＜0.01),NF-κB,IL-6,TNF-α水平降低(P＜0.05,P＜0.01);血尿胶囊低剂量组左右肾比值降低,脏器指数降低(P＜0.05,P＜0.01),WBC,NEUT,MONO,LY水平降低(P＜0.05,P＜0.01),NF-κB,IL-6,TNF-α水平降低(P＜0.05,P＜0.01);血尿胶囊中剂量组左右肾比值降低,脏器指数降低(P＜0.05,P＜0.01),WBC,NEUT,MONO,LY水平降低(P＜0.05,P＜0.01),IL-6,TNF-α水平降低(P＜0.05,P＜0.01);血尿胶囊高剂量左右肾比值降低,脏器指数降低(P＜0.05,P＜0.01),WBC,NEUT,MONO,LY水平降低(P＜0.05,P＜0.01),NF-κB,IL-6,TNF-α水平降低(P＜0.05,P＜0.01).网络药理学分析得到菝葜活性化合物17种,薏苡仁活性化合物18种,棕榈子活性化学物6种,血尿胶囊治疗APN关键基因39个,GO分析富集704生物学过程,22个细胞组成,59个分子功能,KEGG信号通路共富集62条通路.实验验证结果表明与空白组比较,模型组的前列腺素-过氧化物合成酶2(PTGS2),丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1),磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),蛋白激酶B2(Akt2),Janus激酶2(JAK2),信号转导和转录激活因子3(STAT3)mRNA的表达量和PI3K,Akt2,JAK2,STAT3蛋白表达量显著升高(P＜0.01);与模型组比较,血尿胶囊低剂量组MAPK1,PI3K,JAK2,STAT3 mRNA表达量和PI3K,JAK2,STAT3蛋白表达量显著降低(P＜0.01);中剂量组MAPK1,PTGS2,PI3K,JAK2,STAT3 mRNA表达量和PI3K,JAK2,STAT3蛋白降低(P＜0.05,P＜0.01);高剂量组PTGS2,MAPK1,PI3K,Akt2,JAK2,STAT3 mRNA表达量和PI3K,Akt2,JAK2,STAT3蛋白表达量降低(P＜0.05,P＜0.01).结论:血尿胶囊对APN具有一定的疗效,血尿胶囊发挥作用为多靶点,多途径的,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路和JAK2/STAT3信号通路活性表达有关.
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