【摘 要】
：
目的 克隆表达粉尘螨第五组变应原(Dermatophagoides farinae,Der f5)基因,并鉴定纯化蛋白免疫原性.方法 提取活粉尘螨总RNA,扩增Der f5片段.PCR产物与克隆载体pMD18-T连接,
论文部分内容阅读
目的 克隆表达粉尘螨第五组变应原(Dermatophagoides farinae,Der f5)基因,并鉴定纯化蛋白免疫原性.方法 提取活粉尘螨总RNA,扩增Der f5片段.PCR产物与克隆载体pMD18-T连接,转化入大肠埃希菌JM109,经酶切及测序鉴定获得pMD18-Der f5阳性菌株,再提取质粒进行双酶切,与表达载体pET-30a(+)连接,转化人大肠埃希菌BL21,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blotting)鉴定其表达效果.Ni-IDA亲和层析柱纯化蛋白,利用尘螨病人血清鉴定其免疫原性.结果 构建了重组质粒pMD18-Der f5和pET30a-Der f5,SDS-PAGE结果表明Der f5基因在BL21中获得良好的可溶性表达,蛋白质分子量与理论值相符.纯化的蛋白与病人血清有良好的IgE结合活性.结论 获得广州地区Der f5的原核表达载体,高效表达纯化重组蛋白.初步鉴定了该蛋白的免疫原性.
其他文献
北京一觉醒来,一撩胳膊,扫着天津了,一瞠脚丫子,够着上海啦!北京大了,跑趟天津跟遛趟王府井似的,世界小了,从上海打个来回什/厶烦心事都摆平了!因为时速350公里的城际铁路,北
随着社会发展,东西方艺术正在发生悄然的变化,著名油画家,中央美院前院长靳尚谊先生曾说过,如今欧洲绘画特别是油画处于消亡状态,只有在博物馆中才能够欣赏到的同时,唯有俄罗
银行上市之前的重点有四个方面:一是进行上市规划,把握战略重点;二是强化银行的核心业务;三是提高银行的透明度;四是风险管理.
加息既成事实,在此问题上已无需花费太多的时间来进行争论了,比较以往紧缩性政策出台后的经济走向,现在我们需要关心的是,加息之后中国的经济将会出现什么样的变化.
近几年,在伴随全球逐渐一体化发展后,国学热又重新出现在当前社会中。这一阵潮流使得我国原本已逐渐消失的传统文化又重新以新的姿态出现在人们的视线当中,导致这一现象的发
北京交通大学一直非常重视对家庭经济困难学生的教育与资助工作,目前学校已经按照新的要求,建立了一整套比较完善的“以国家助学贷款为主体,奖学金、助学金、勤工助学、减免
目的 社鼠是东洋界种,不仅一直被认为是农林业有害动物.而且被怀疑为滇西北鼠疫疫源地的鼠疫、恙虫病和流行性出血热(汉坦病毒)等病原体的储存宿主.为了了解洱海周边地带社鼠
在这个信息时代,广告已经深入到生活的各个方面,成为了社会的一种文化.伴随着经济全球化的进程加快,中西方经济文化交流日益密切,我们在要求“引进来”的同时,要大胆的“走出
目的 分析组织特异性表达基因PLUNC的调控元件.方法 采用进化足迹法,结合生物信息学工具,预测PLUNC基因的顺式作用元件和反式作用因子.结果 预测的PLUNC基因的转录起始位点位
在现实社会中,和谐的人际关系尤为重要,拥有良好的人际关系可以使我们的工作得心应手,但是要建立良好的人际关系一般有哪些原则呢?rn要以诚待人,不要过于世故.“诚”是人际交