【摘 要】
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目的 克隆rMrgD基因并于HEK293细胞中表达.方法 利用聚合酶链反应技术,从总RNA中扩增出目的基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1中,构建真核表达rMrgD载体,瞬时转染人胚肾293细
【机 构】
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军事医学科学院毒物药物研究所,北京,100850
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目的 克隆rMrgD基因并于HEK293细胞中表达.方法 利用聚合酶链反应技术,从总RNA中扩增出目的基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1中,构建真核表达rMrgD载体,瞬时转染人胚肾293细胞得到重组质粒表达细胞株.通过免疫荧光和Western印迹检测对表达产物进行鉴定.结果 直接和间接免疫荧光实验皆表明rMrgD主要定位于细胞膜上,Western印迹检测证实rMrgD在HEK293细胞主要以单体和二聚体形式存在.结论 含有rMrgD基因的重组质粒在人胚肾293细胞中获得表达,主要定位于细胞膜上.本研究为进一步探究rMrgD受体的功能奠定了基础.
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