【摘 要】
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为建立一套快速鉴定甜菜品种纯度和真实性的实验体系,对DNA的提取、检测、PCR反应体系、程序、电泳以及显影方法等多个方面进行了优化,最终确立了一套简单、快速、节约、污染
【机 构】
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黑龙江省普通高校甜菜遗传育种重点实验室/黑龙江大学,中国农业科学院甜菜研究所/黑龙江大学农作物研究院,中国农业科学院北方糖料作物资源与利用重点开放实验室
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为建立一套快速鉴定甜菜品种纯度和真实性的实验体系,对DNA的提取、检测、PCR反应体系、程序、电泳以及显影方法等多个方面进行了优化,最终确立了一套简单、快速、节约、污染小的甜菜品种纯度和真实性的鉴定体系。该方法使用96孔PCR板,利用碱裂解法提取干种子（或者叶片干粉）DNA;使用无毒的Gelred替代致癌性的EB,利用λDNA检测提取样品DNA的浓度;PCR反应的体系为5μL,使用多重PCR替代单一PCR;PCR反应程序为94℃变性15 s,退火15 s,72℃延伸30 s,30个循环,最后72℃延伸5
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