浅析生活用纸微生物的检验方法

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  摘要:生活用纸是人们生活中不可或缺的日常消费纸品,分为纸巾纸和卫生纸。其中,纸巾纸分为纸面巾、纸餐巾、纸手帕等,卫生纸分为卷纸、盘纸、平切纸和抽取式卫生纸等。随着生活质量的提升,人们对于生活用纸的质量要求也不断提升,于是开始关注生活用品的成色、柔软度、微生物含量及是否含有可迁移性荧光增白剂等。研究发现生物检测方法是传统的生活用纸微生物检验方法,经长期发展已经得到业界的普遍认可,但检测步骤上过于繁杂。化学比色法比较方便,检验过程中需要的工具最为简便,成本也较低。随着显微镜等物理测量设备的不断发展,未来在生活用纸微生物检验中必然能得到广泛应用。希望可以为生活用纸微生物检验的方法研究提供参考。
  关键词:生活用纸;微生物;检验
  1.引言
  随着人们生活水平的不断提升,生活用纸已经充斥着人们生活的各方各面,人们对生活用纸的质量要求也不断提升,尤其在微生物方面。纸巾纸产品按照现行国家标准GB/T 20808-2011《纸巾纸》的规定,共有细菌菌落总数、大肠菌群、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、真菌菌落总数6个微生物指标。卫生纸产品按照现行国家标准GB/T 20810-2006 《卫生纸(含卫生纸原纸)》的规定,共有细菌菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌4个微生物指标。这些微生物的存在,会直接影响到生活用纸的使用安全性,長期使用微生物超标的生活用纸会对身体健康造成不良影响,因此急需得到严格的控制和管理。
  2.生活用纸微生物控制要求
  国家生活用纸相关制度规范中对微生物含量提出了严格的要求,尤其是大肠菌群、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌均不应检出。如果生活用纸的致病菌、大肠杆菌群数等微生物超标,除了会影响纸巾的使用质量,还将直接在人们使用过程中进入口鼻,会直接危害人体健康[1]。因此,在生活用纸的生产过程中,必须通过精密的仪器设备和科学的检测方法,只有过了检测一关,才能够及时发现生活用纸微生物的含量是否超标,严格控制生活用纸微生物的含量,杜绝不合格的生活用纸流向市场。
  3.生活用纸微生物的检验方法
  3.1检验原理
  对生活用纸进行微生物的检验首先要进行微生物的培养,待微生物培养成菌落后方能进行其种类及数量的测量。原理是在100级净化条件下,将生活用纸样品剪碎后加入灭菌生理盐水中,充分混匀,得到一个生理盐水样液,将生理盐水样液作为检测对象进行微生物培养,等到生活用纸中的微生物形成一定菌落后再进行测量,以此来提升检测的精度[2]。具体检测步骤如下:
  3.2试样和设备准备
  用于微生物检验的生活用纸的包装不应有破裂,检验前不得启开。检验中要避免外界微生物含量的干扰,因此需要生化培养箱、超净工作台灭菌锅等设备来创造一个无菌的检验环境。
  3.2.1培养基与试剂的制备
  在微生物检验之前需要进行培养基与试剂的制备,方能检测出较为精准的数据。具体的培养基及试剂包括营养琼脂培养基、沙氏琼脂培养基、乳糖胆盐发酵管、SCDLP培养液、7.5%氯化钠肉汤培养液、葡萄糖肉汤、营养肉汤培养液、伊红美蓝琼脂培养基、革兰氏染色液、甘露醇发酵培养基及乳糖发酵管等。
  3.2.2生理盐水样液制配
  首先要在超净工作台中将生活用纸的外包装使用酒精消毒,准确称取10g生活用纸样品,剪碎后加入到200mL灭菌生理盐水中,充分混匀,得到一个生理盐水样液。
  3.2.3细菌菌落总数检测方法
  待上述生理盐水样液自然沉降后取上清液作菌落计数。共接种5平皿,每个平皿中加入1mL样液,然后用冷却至45℃左右的熔化的营养琼脂培养基15~20mL倒入每个平皿内混合均匀。待琼脂凝固后翻转平皿置35 ℃±2℃培养48h后,计算平板上的菌落数。
  3.2.4真菌菌落总数检测方法
  待上述生理盐水样液自然沉降后取上清液作真菌计数。共接种5个平皿,每个平皿中加入1mL样液,然后用冷却至45℃左右的熔化的沙氏琼脂培养基 15 25 mL倒入每个平皿内混合均匀,琼脂凝固后翻转平皿置25℃±2℃培养 7天,分别于3、5、7天观察,计算平板上的菌落数,如果发现菌落蔓延,以前一次的菌落计数为准。
  3.2.5大肠菌群检测方法
  取样液5mL接种50mL乳糖胆盐发酵管,置35℃±2℃培养24 h,如不产酸也不产气,则报告为大肠菌群阴性。
  如产酸产气,则划线接种伊红美蓝琼脂平板,置35℃±2℃培养18~24h,观察平板上菌落形态。典型的大肠菌落为黑紫色或红紫色,圆形,边缘整齐,表面光滑湿润,常具有金属光泽,也有的呈紫黑色,不带或略带金属光泽,或粉红色,中心较深的菌落。
  挑疑似菌落1~2个作革兰氏染色镜检,同时接种乳糖发醉管,置35 ℃±2℃培养24h,观察产气情况。
  3.2.6绿脓杆菌检测方法
  取样液5mL,加入到50mLSCDLP培养液中,充分混匀,置35 ℃±2℃培养18~24h。如有绿脓杆菌生长,培养液表面呈现一层薄菌膜,培养液常呈黄绿色或蓝绿色。从培养液的薄菌膜处挑取培养物,划线接种十六烷三甲基溴化铵琼脂平板,置35℃±2℃培养18~24h,观察菌落特征。绿脓杆菌在此培养基上生长良好,菌落扁平,边缘不整,菌落周围培养基略带粉红色,其他菌不长。
  取可疑菌落涂片作革兰氏染色,镜检为革兰氏阴性菌者应进行下列试验:
  氧化酶试验:取一小块洁净的白色滤纸片放在灭菌平皿内,用无菌玻棒挑取可疑菌落涂在滤纸片上,然后在其上滴加一滴新配制的 1%二甲基对苯二胺试液,30s内出现粉红色或紫红色,为氧化酶试验阳性,不变色者为阴性。
  绿脓菌素试验:取2~3个可疑菌落,分别接种在绿脓菌素测定用培养基斜面,35 ℃±2℃培养24 h,加入三氯甲烷3~5 mL,充分振荡使培养物中可能存在的绿脓菌素溶解,待三氯甲烷呈蓝色时,用吸管移到另一试管中并加入1mol/L的盐酸1mL,振荡后静置片刻。如上层出现粉红色或紫红色即为阳性,表示有绿脓菌素存在。   硝酸盐还原产气试验:挑取被检菌落纯培养物接种在硝酸盐胨水培养基中,置35℃±2℃培养24h,培养基小倒管中有气者即为阳性。
  明胶液化试验:取可疑菌落纯培养物,穿刺接种在明胶培养基内,置35 ℃±2℃培养24h,取出放于4~10℃,如仍呈液态为阳性,凝固者为阴性。
  42℃生长试验:取可疑培养物,接种在普通琼脂斜面培养基上,置42℃培养24~48h,有绿脓杆菌生长为阳性。
  3.2.7金黄色葡萄球菌检测方法
  若样品为纸巾纸,则取样液5mL加入到50mLSCDLP中,若样品为卫生纸,则取样液5mL加入到50mL7.5%氯化钠肉汤培养液中,充分混匀,置35℃±2℃培养24h。
  自上述增菌液中取1~2接种环,划线接种在血琼脂培养基上,置35℃±2℃培养24~48h。在血琼脂平板上该菌菌落呈金黄色,大而突起,圆形,表面光滑,周围有溶血圈。
  挑取典型菌落,涂片作革兰氏染色镜检,金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌,排列成葡萄状,无芽胞与荚膜。镜检符合上述情况,应进行下列试验:
  甘露醇发酵管验:取上述菌落接种到露醇培养基中,置35℃±2℃培养24 h,发酵甘露醇产酸者为阳性。
  血浆凝固酶试验:玻片法:取清洁干燥载玻片,一端滴加一滴生理盐水,另一端滴加一滴兔血浆,挑取菌落分别与生理盐水和血浆混合5min。如血浆内出现团块或颗粒状凝块,而盐水滴仍呈均匀混浊无凝固则为阳性,如两者均无凝固則为阴性。凡盐水滴与血浆滴均有凝固现象,再进行试管凝固酶试验;试管法:吸取1:4新鲜血浆0.5mL,放灭菌小试管中,加入等量待检菌24h肉汤培养物0.5 mL。混匀放35 ℃±2℃温箱或水浴中,每半小时观察一次,24h之内呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物各0.5mL作为阳性与阴性对照。
  3.2.8溶血性链球菌检测方法
  若样品为纸巾纸,则取样液5mL加入到50mL葡萄糖肉汤中,若样品为卫生纸,则取样液5mL加入到50mL营养肉汤培养液中,35℃±2℃培养24h。
  将培养物划线接种血琼脂平板,35℃±2℃培养24 h观察菌落特征。溶血性链球菌在血平板上为灰白色,半透明或不透明,针尖状突起,表面光滑,边缘整齐,周围有无色透明溶血圈。
  挑取典型菌落作涂片革兰氏染色镜检,应为革兰氏阳性,呈链状排列的球菌。镜检符合上述情况,应进行下列试验:
  链激酶试验:吸取草酸钾血浆0.2 mL(O.01g草酸钾加5mL兔血浆混匀,经离心沉淀,吸取上清液),加入0.8mL灭菌生理盐水,混匀后再加入
  待检菌24 h肉汤培养物0.5 ml和0.25%氯化钙0.25mL,混匀,放35℃±2℃水浴中,2min观察一次(一般10min内可凝固),待血浆凝固后继续观察并记录溶化时间。如2h内不溶化,继续放置24 h观察,如凝块全部溶化为阳性,24 h仍不溶化为阴性。
  杆菌肽敏感试验:将被检菌菌液涂于血平板上,用灭菌镊子取每片含0.04单位杆菌肽的纸片放在平板表面上,同时以已知阳性菌株作对照,在35℃±2℃下放置18~24h,有抑菌带者为阳性。
  3.3生活用纸微生物检验技术的发展
  上述生物检测方法是传统的生活用纸微生物检验方法,经长期发展已经得到业界的普遍认可。但从检测步骤上看过于繁杂,因而还要不断改进生活用纸微生物检验方法。
  3.3.1化学比色法
  生活用纸的微生物检验也可采用化学比色法。检测的工具主要是各种检测试剂和试纸,其原理是生活用纸中的微生物遇到各种检测试剂和试纸时会产生明显颜色的化学反应,将反应结果和标准比色卡对比,就可以实现生活用纸微生物的检验。当然,该种检测方法中,由于人眼的辨别能力有限,加上测试剂和试纸制备质量参次不齐,种种原因都可能会影响到检测的质量。但该种方法最大的优点在于比较方便,其检验过程中需要的工具最为简便,成本也最低,也无需经专业的化学计算,其在半定量或定性分析上具有一定可行性。
  3.3.2物理检测法
  生活用纸的微生物检验也可采用物理检验方法,其原理是直接使用显微镜等物理测量设备检测生活用纸微生物。
  红外检验法的原理是将餐巾纸、卫生纸等生活用纸纸悬液中的微生物细胞经甲醇分解、水解或硅烷化、甲基化等处理后,使之分解成为各种化学组分。分解为化学组分后,采用气相色谱仪进行检测得到色谱图。由于通常得到的色谱图中大多数的峰是共性的,仅存在少量具有特征性的峰,而这些特征性的峰就是生活用纸微生物检验的关键,可用于生活用纸中微生物鉴定,如鉴定出细菌、酵母菌、霉菌等微生物种类。随着信息技术的不断发展,红外检验设备已经日益朝着信息集成化方向发展,生活用纸微生物检测中完后,立马可读取取微生物的含量,这给卫生用纸微生物的含量检测效率的提升带来了极大的福音。
  显微镜检测也即直接使用显微镜进行生活用纸的微生物检验。当前市场中已经出现美国3M公司的petrifilm TM Plate系列微生物测试片,可实现大肠菌群计数、霉菌和酵母计数、检测菌落总数等微生物等检验,基本可以满足生活用纸的微生物检验[3]。该种方式的优点主要在于检验的成本较低,检验也较为方便,当然,随着显微镜等物理测量设备的不断发展,物理检测法的检验精度也在不断提升,未来在生活用纸微生物检验中必然能得到广泛应用。
  4.结语
  本文关于生活用纸微生物检验方法的研究,分析了生活用纸微生物检验、化学比色法、物理检测法等方法。分析得出上述生物检测方法是传统的生活用纸微生物检验方法,经长期发展已经得到业界的普遍认可,但从检测步骤上看过于繁杂,因而还要不断改进生活用纸微生物检验方法。化学比色法最大的优点在于比较方便,其检验过程中需要的工具最为简便,成本也最低,也无需经专业的化学计算,其在半定量或定性分析上具有一定可行性。物理检测法的检验精度也在不断提升,随着显微镜等物理测量设备的不断发展,未来在生活用纸微生物检验中必然能得到广泛应用。
  参考文献:
  [1]涂文利,朱博,杨晓锋. 新型微生物控制技术在生活用纸中的应用[J]. 生活用纸,2016,16(9):72-75.
  [2]吴高芳. 咸丰县生活用纸微生物污染状况的检测[J]. 医学信息,2013(27):131-131.
  [3]申海鹏. 3M食品安全推出24小时菌落总数检测方法——3M~(TM) Petrifilm~(TM)快速菌落总数测试片上市已获AOAC-PTM认证[J]. 食品安全导刊,2015(z1):48-48.
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