单核细胞增多性李斯特菌hlyA基因序列及溶血素活性测定

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ayhui2046
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从3株不同来源的单核细胞增多性李斯特菌中PCR扩增溶血素编码基因hlyA,连接到T克隆载体转化到受体菌DH5α中,经菌落PCR和提取质粒酶切鉴定后测序,对测定的hlyA基N核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行分析,结果表明,从3个菌株克隆的hlyA基N具有完整的开放阅读框,同源性在96.9%以上;其推导的LLO氨基酸序列同源性在97.9%以上,N端存在相同的PEST基序,C端存在相同的保守性11肽结构。建立和运用分光光度法对3个试验菌株的溶血素活性进行了检测,结果表明,在pH5.6时LLO溶血活性最高,在pH
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