猪传染性胃肠炎病毒S基因不同编码区的表达和反应原性鉴定

来源 :华北农学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mayi2800
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
通过原核表达系统表达猪传染性胃肠炎病毒( TGEV) S基因不同编码区,以鉴定不同编码区表达产物与TGEV抗体的结合能力。在对TGEV S蛋白抗原位点分析的基础上,针对S蛋白N端的4个抗原位点C、B、D和A,设计引物分别扩增含C、B位点的TCB片段(411 bp)、含D位点的TD片段(441 bp)和含A位点的TA片段(456 bp),经克隆测序后分别插入原核表达载体pET-32a中进行表达,SDS-PAGE电泳显示各片段均高效表达,表达的TCB片段、TD片段和TA片段融合蛋白大小分别为34.6,35.1,36.1 kDa。 Western Blot结果表明,表达蛋白与TGEV感染猪阳性血清和His标签抗体均产生阳性反应。结果显示,3个S基因编码片段均具有与TGEV抗体结合的能力,为进一步鉴定不同编码区的免疫原性及抗原保护能力奠定了基础。“,”To identify immunoreactivity of different encoding regions of the spike ( S ) gene of Transmissible gastroenteritis virus ( TGEV) ,three encoding regions containing four antigenic sites C,B,D and A located at the N-terminus of S protein was analyzed and expressed by prokaryotic expression system. The fragments TCB ( containing antigenic sites C and B,411 bp) ,TD ( containing antigenic site D,441 bp) and TA ( containing antigenic site A, 456 bp) were amplified by PCR. After cloning and sequence,the fragments were inserted into the prokaryotic ex-pression vector pET-32a respectively. The fusion proteins yielded by TCB,TD and TA recombinant expression plas-mids were 34. 6,35. 1,36. 1 kDa respectively. The expressed proteins showed strong positive reaction with TGEV-infected swine serum and His tag antibody by Western Blot. These results indicated that the three encoding regions of S gene had a strong immunoreactivity with TGEV positive antiserum,which will play an essential role in identif-ying immunogenicity and immunological protection of different encoding regions of the S protein of TGEV.
其他文献
2004~2005年经营年度,丰乐种业玉米瓜菜总公司在全体干部员工的努力下,在全国玉米瓜菜代理商及各级客户大力支持下,圆满超额的完成了销售任务,取得了较好的业绩.为了感谢各合
《河南农业科学》是河南省农业科学院主办的综合性农业科技期刊。多年来,深受省内外农业科技人员、农业院校师生等涉农读者的喜爱。本刊连续被评为全国中文核心期刊、中国科技
研究清热生肌膏对大鼠深Ⅱ度烫伤创面的保护作用及作用机制.将SD大鼠100只随机分成模型组、烧伤膏组、清热生肌膏高剂量组、清热生机膏低剂量组.模型组及治疗组采用烫伤仪持
期刊
为克隆、表达单核细胞增生李斯特菌sRNA分子伴侣蛋白hfq基因,并纯化重组蛋白,通过PCR的方法从单核细胞增生李斯特菌基因组DNA中扩增出hfq基因,将扩增产物克隆于pMD18-T载体中,测
期刊
本试验旨在研究不同蛋白水平精料补饲料对隔栏补饲羔羊生长性能和营养物质消化率的影响.试验采用单因素完全随机分组设计,将36只15日龄的小尾寒羊×杜泊绵羊杂交一代羔羊随机
通过大田间小区试验,在贵州省仁怀市针对烤烟双行凹垄全生育期地膜覆盖开展免追肥条件下的不同肥料配方田间效果对比研究.结果表明,从烤烟的经济指标、内在质量和化肥减施综
为探讨TaAP1-3基因在小麦三雌蕊性状形成中的作用,从小麦三雌蕊近等基因系CM28和CM28TP中克隆得到3个同源基因TaAP1-3a、TaAP1-3b和TaAP1-3c。通过碱基序列、氨基酸序列、聚