晚期内皮祖细胞大量扩增方法

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目的 通过实验验证一个体外大量扩增晚期内皮祖细胞( EPC)的方法.方法 先预铺经辐射后的滋养层细胞(晚期EPC或脐带脐静脉内皮细胞),而后植入分离的人外周血单个核细胞,计数并对比培养21 d后获得的晚期EPC克隆数目,并检测目的细胞免疫表型,应用基质胶( matrigel)鉴定其体外管状结构形成能力.结果 21 d时在预铺的两种滋养层细胞培养条件下获得的晚期EPC克隆数目均比无滋养层细胞的培养方法高20倍(40.0±3.9、39.3 ±3.1比2.0±1.3,均P<0.05);且细胞克隆出现的早.目的细胞表达CD31、CD34、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血管内皮细胞生长因子受体Flt-1、CD146的2个表型(P1H12、Sendo)、血管内皮钙黏蛋白(VEcadherin)、CD117,且具有能在体外与matrigel形成管状结构的功能.结论 通过提供滋养层细胞的方法可以大量扩增晚期EPC,提示微环境在晚期EPC扩增中起重要作用.
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