【摘 要】
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将AsiaⅠ型口蹄疫病毒YNBS/58株VP1基因和去信号肽的牛α-干扰素基因共同亚克隆于原核表达载体pET-28a中,转化BL21后经IPTG诱导,实现了重组融合蛋白VP1-BoIFN-α在大肠埃希氏
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划);
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将AsiaⅠ型口蹄疫病毒YNBS/58株VP1基因和去信号肽的牛α-干扰素基因共同亚克隆于原核表达载体pET-28a中,转化BL21后经IPTG诱导,实现了重组融合蛋白VP1-BoIFN-α在大肠埃希氏菌BL21中的高效表达,表达产物经SDS-PAGE和Western-blotting分析,重组的VP1-BoIFN-α蛋白分子质量约为46 ku,与预期大小相符.薄层扫描分析显示,重组蛋白VP1-BoIFN-α的表达量占菌体总蛋白的30%,且以包涵体的形式存在.包涵体提取物用8 mol/L尿素溶解后,在变性条件下利用Ni-NTA柱对VP1-BoIFN-α融合蛋白进行了纯化.
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