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目的检测肝外胆管癌患者胆汁上清液及沉淀物中K-ras、p53基因突变情况,探讨其意义。方法选取肝外胆管癌患者57例、胆管良性狭窄患者42例,均收集并提取胆汁上清液及沉淀物标本,采用PCR-SSCP银染法和DNA直接测序法分析K-ras和p53基因突变情况。结果胆管良性狭窄患者胆汁上清液及沉淀物标本均未发现K-ras、p53基因突变。胆管癌患者胆汁中K-ras基因突变率为77.19%(44/57),其中上清液为66.67%(38/57)、沉淀物为59.65%(34/57),两者比较P>0.05;p53基因突变率为70.18%(40/57),其中上清液为63.16%(36/57)、沉淀物为45.61%(26/57),两者比较P<0.05。胆管癌患者胆汁上清液和沉淀物中p53基因和K-ras基因突变联合检测突变率为85.97%(49/57)。结论肝外胆管癌患者胆汁上清液及沉淀物中均检测到K-ras、p53基因突变,且联合检测阳性率更高;胆汁K-ras、p53基因突变检测可用于肝外胆管癌与胆管良性狭窄的鉴别诊断。