【摘 要】
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目的制备结缔组织生长因子(CTGF)抗原,建立ELISA检测方法.方法从血管内皮细胞中提取总RNA,逆转录合成cDNA,设计特异性引物,通过PCR方法扩增CTGF C区242～349位氨基酸基因,插入
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目的制备结缔组织生长因子(CTGF)抗原,建立ELISA检测方法.方法从血管内皮细胞中提取总RNA,逆转录合成cDNA,设计特异性引物,通过PCR方法扩增CTGF C区242～349位氨基酸基因,插入噬菌体包膜蛋白基因Ⅲ的上游,制备CTGF融合蛋白.用纯化后的融合蛋白免疫家兔,获得抗体,抗体纯化后标记HRP,建立ELISA.结果成功克隆CTGF C区基因,插入表达载体经IPTG诱导后获得分子量为25 000的融合蛋白,免疫学检测证实为CTGF.所得抗体用HRP标记.建立的ELISA法检测灵敏度为2 ng/
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