论文部分内容阅读
[目的]构建胰岛素原真核表达载体,在肝细胞内实现葡萄糖调控下的成熟胰岛素的表达.[方法] (1)RT-PCR方法从胎儿胰腺获取野生型人胰岛素原cDNA;(2)重叠延伸PCR法在人胰岛素原cD N A上制造两个点突变,该胰岛素原cDNA片段命名为胰岛素/furin(INS/furin);(3)将INS/furi n亚克隆至含葡萄糖反应元件(GlRE)的p(GlRE)3BP-1Luc的多克隆位点上.[结果]HindⅢ和EcoRV酶切及测序均证实载体p(GlRE)3BP-11×furin构建成功 .[