了解2014~2017年南京地区诺如病毒胃肠炎暴发流行特征、变化规律和流行株特征,为疫情控制、疫苗研发提供科学依据。收集2014年9月至2017年8月南京地区12个区疾控上送85起疑似诺如病毒急性胃肠炎暴发样本,应用荧光定量PCR和一步法RT-PCR检测诺如病毒基因序列,测序后利用分子生物学软件对序列进行分析。其中66起诺如病毒检测阳性,暴发集中于幼儿园和小学,冬春季节高发。诺如病毒优势株在连续的几个流行季持续变化,由GII.4/Sydney 2012转变为新型GII.P17-GII.17,再到GII.P16-GII.2。其中GII.P16-GII.2与全球2016~2017年参考株同源性达98.4%~99.5%。2014~2017年南京地区诺如病毒急性胃肠炎暴发的流行强度呈上升趋势。引起暴发的诺如病毒以GII为主,含多种基因型,并存在重组株,优势基因型在连续的几个流行季持续改变。诺如病毒近几年不断变异,从而逃脱人群免疫,可能是其流行趋势上升的原因之一。