建立了超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)定量检测人体内叶酸6种主要代谢产物的方法。采用BEH C18色谱柱(2.1×50 mm,1.7μm),以甲酸-乙腈为流动相,流速为0.4 m L/min,进样体积5μL,梯度洗脱法进行分离,电喷雾正离子模式下以多反应检测(MRM)方式检测,外标法定量。6种叶酸代谢产物检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别为0.05~0.20 ng/m L和0.15~0.50 ng/m L,6种代谢产物(叶酸、5-甲基四氢叶酸(5-Me THF)、5-甲酰四氢叶酸(5-Fo THF)、同型半胱氨酸(Hcy)、S-腺苷甲硫氨酸(SAM)和S-腺苷高半胱氨酸(SAH))分别在一定范围内呈线性相关,相关系数R2≥0.998;在血清样品中加标回收率为90.1%~105.3%,日内和日间RSD均小于6%。