PRL-3真核绿色荧光蛋白表达载体的构建及其在结肠癌SW480细胞中的表达

来源 :世界华人消化杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：bjw72

【摘要】

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目的：构建蛋白酪氨酸磷酸酶-3（PRL-3）绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-N1-PRL-3，为PRL-3基因功能研究奠定基础.方法：设计人PRL-3特异性引物，提取人大肠癌细胞系SW620细胞总RNA，应用RT

【作者】

：

柳玉红李建明周军丁彦青

【机构】

：

南方医科大学南方医院病理科

【出处】

：

世界华人消化杂志

【发表日期】

：

2008年6期

【关键词】

：

蛋白酪氨酸磷酸酶-3 真核表达绿色荧光蛋白稳定转染 PRL-3Eukaryotic expressionGreen fluorescent proteinS

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目的：构建蛋白酪氨酸磷酸酶-3（PRL-3）绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-N1-PRL-3，为PRL-3基因功能研究奠定基础.方法：设计人PRL-3特异性引物，提取人大肠癌细胞系SW620细胞总RNA，应用RT-PCR方法获取人PRL-3全长cDNA，分别克隆至T载体及真核绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1，应用PCR、酶切及DNA测序进行鉴定，确认后转染大肠癌细胞SW480，应用G418进行筛选获取PRL-3稳定表达细胞克隆，应用荧光定量PCR检测PRL-3基因表达.结果：获得522 bp的PR

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