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为了快速、准确定量多鳍鱼Shh基因在机体组织中的表达水平，根据笔者克隆的Shh基因序列，选择其高度保守区域设计一对引物，对多鳍鱼各组织提取mRNA，经RT-PCR扩增，产物纯化后与pGEM—T—easy连接，转化大肠杆菌DH50[。筛选后得到重组标准品质粒，对重组标准品质粒进行酶切、PCR和测序鉴定，表明Shh基因保守区段已经成功克隆。将重组标准品质粒进行倍比稀释，然后以此为模板。进行荧光定量PCR，系统自动分析软件显示Cf值与标准品浓度的对数之间存在良好的线性关系。回归方程为y=-0.32x＋10．47