【摘 要】
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通过RT-PCR方法把葡萄扇叶病毒(GFLV)外壳蛋白基因(CP gene)分成两部分扩增,扩增产物克隆入pGEM-5Zf(+)载体,并通过BglⅢ位点连接成一完整的外壳蛋白基因,通过序列分析测得全
【机 构】
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中国科学院微生物研究所,中国科学院微生物研究所,中国科学院微生物研究所 北京 100080,北京 100080,北京 100080
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通过RT-PCR方法把葡萄扇叶病毒(GFLV)外壳蛋白基因(CP gene)分成两部分扩增,扩增产物克隆入pGEM-5Zf(+)载体,并通过BglⅢ位点连接成一完整的外壳蛋白基因,通过序列分析测得全长外壳蛋白基因为1512bp,编码504个AA＇s,与国外株系GFLV-F13相比,核苷酸同源性为88.4％,氨基酸同源性为95.8％。并且这一外壳蛋白基因在大肠杆菌E.coli DH-5α中得到了表达。
The CP gene of grapevine leaf fan virus (GFLV) was amplified by RT-PCR and amplified into two parts. The amplified product was cloned into pGEM-5Zf (+) vector and ligated into a complete coat protein The full-length coat protein gene was 1512bp and encoded 504 AA’s. The nucleotide homology was 88.4% and the amino acid homology was 95.8% compared with the foreign strain GFLV-F13. And this coat protein gene was expressed in E. coli DH-5α.
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