一种新型大量粪便肠黏膜提取方法在结直肠癌筛查中的应用

来源 :中华胃肠外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:l_chuanfei
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目的

探讨一种新型的大量粪便肠黏膜提取方法在结直肠癌筛查中的应用。

方法

收集2014年3—4月间,于南京中医药大学第三附属医院拟行手术治疗的10例结直肠癌患者术前1次完整粪便标本和手术切除癌组织标本。同时收集6例肠镜检查未见异常的6例同期住院患者的肠黏膜组织及1次完整粪便标本。使用自制的肠黏膜收集器(该肠黏膜收集器由上、中、下3个体积为1 000 ml容器组成,3层底部均分别有层滤网,孔径分别为100、200及300目,逐层过滤后收集液体)肠黏膜脱落细胞,采用粪便DNA试剂盒提取脱落细胞DNA,检测DNA浓度及纯度(A260/A280),并对提取的粪液以及肠黏膜组织进行甲基化测序。

结果

DNA甲基化测序发现,FBN1、SPG20及SNCA基因在10例结直肠癌患者的癌组织和粪便提取液标本中CpG岛均出现甲基化,而在6例对照患者的活检肠黏膜和粪便提取液标本中均未发现甲基化。粪便重量在100 g以下时,粪液收集率在60%~80%之间;粪便重量超过100 g后,粪液收集率不稳定;粪便重量在50~100 g之间时,DNA的A260/A280值在1.6~1.8之间,浓度在5.0~56.1 μg/ml之间。

结论

本研究采用自行设计的大量粪便肠黏膜收集器一次性处理50~100 g粪便时,粪液收集率较为稳定,可获取纯度和浓度较高的DNA,达到检测结直肠肿瘤甲基化状态的需要,便于结直肠癌的筛查。

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