粪便DNA亚硫酸盐快速处理方法的探讨

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目的探讨从微量的粪便中运用亚硫酸盐法成功处理DNA甲基化的方法,寻求最适宜的亚硫酸盐的浓度以及处理时间。方法收集我科员工新鲜粪便标本(经胃镜及结肠镜证实无消化道肿瘤),经亚硫酸盐方法处理后,对大肠埃希菌进行PCR检测,检测结果使用ABI310测序仪器进行测序。结果在最终浓度为2.63 mol亚硫酸盐、并经过95℃15min,4℃10 min,75℃60 min处理;2.11 mol亚硫酸盐经过95℃15 min,4℃10 min,75℃165 min处理均能将E.coli DNA的胞嘧啶(C)转变为尿嘧啶
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