论文部分内容阅读
目的构建携带HPV亚型L1基因片段的标准细胞株。方法根据HPV通用引物GP5^+/GP6^+,用重叠延伸PCR方法合成HPV亚型L1基因中约150bp片段;插入真核细胞表达载体EGFP—N1,用脂质体转染SPC细胞,筛选以获得带有不同HPV L1基因片段细胞克隆,并用定量PCR方法确认。结果重叠延伸PCR后得到约150bp的基因片段,测序结果经BLAST比对,分别与相应HPV亚型公开报告序列一致;将所获片段与EGFP-N1载体连接后酶切及测序鉴定正确;经筛选获得了携带HPV6、11、16、18、31、35