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目的
观察TUG1基因沉默对胶质瘤细胞生长和凋亡的影响。
方法构建携带shRNA-TUG1的慢病毒载体pLenti6.3-EGFP，将慢病毒载体感染人胶质瘤U251细胞。采用实时荧光定量PCR检测U251细胞中长链非编码RNA(lncRNA) TUG1基因的表达，观察干扰载体对TUG1基因的抑制效果。应用流式细胞术和CCK-8法观察干扰TUG1基因对U251细胞增殖和凋亡的影响。
结果实时荧光定量PCR检测结果显示，对于TUG1的相对含量，U251空白对照组(0.40±0.05)、阴性对照组(1.01±0.12)、siRNA-1组(0.09±0.01)、siRNA-2组(0.32±0.01)、siRNA-3组(0.18±0.04)、siRNA-4组(0.18±0.02)之间的差异有统计学意义(P<0.05)。选择干扰效果最好的siRNA-1进行后续干扰实验，TUG1干扰组感染72 h时的细胞凋亡率[(11.58±0.11)%]高于空白对照组[(8.55±0.23)%]和阴性对照组[(9.14±0.17)%](均P<0.05)；TUG1干扰组感染72 h的细胞增殖能力(0.64±0.23)低于空白对照组(1.07±0.50)和阴性对照组(0.94±0.42)(均P<0.05)。
结论TUG1基因沉默能够抑制胶质瘤U251细胞的增殖，促进细胞凋亡。