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目的:探索低浓度胰酶消化分离脊髓源性神经干细胞的最佳作用时间。方法:选用新生24h内大鼠的脊髓,取材后分别以0.125%胰蛋白酶37℃振荡消化15,30,45,60min和4℃消化过夜,以获取细胞。培养1周后分别计数和比较各组成活神经球数。nestin荧光染色及诱导神经球分化鉴定神经干细胞。结果:4℃过夜组培养失败,其余各组均培养出nestin表达阳性的神经球。15~60min各组培养1周后获得的神经球数为(2.8±0.81),(4.1±0.71),(7.5±1.44),(6