【摘 要】
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目的 探讨表皮生长因子(EGF)对5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗损伤小鼠骨髓基质细胞(OP9)的保护作用.方法 首先建立5-FU化疗损伤OP9细胞模型并摸索EGF作用剂量.然后,将实验分为空白对
【机 构】
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广州中医药大学基础医学院,南京中医药大学基础医学院
【基金项目】
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广东省高等学校优秀青年教师培养计划项目;国家自然科学基金资助项目
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目的 探讨表皮生长因子(EGF)对5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗损伤小鼠骨髓基质细胞(OP9)的保护作用.方法 首先建立5-FU化疗损伤OP9细胞模型并摸索EGF作用剂量.然后,将实验分为空白对照组、模型组、实验组.用25 μg/mL 5-FU作用OP9细胞作为模型组,用20 ng/mL的EGF处理25 μg/mL 5-FU损伤的OP9细胞作为实验组,并设常规培养的OP9细胞作为空白对照组.分别用CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,一氧化氮(NO)测试盒、一氧化氮合酶(NOS)测定试剂盒、Caspase-3活性检测试剂盒分别检测NO、iNOS、TNOS及Caspase-3的含量.结果 与空白对照组比较,模型组细胞存活率明显降低(P＜0.01);与模型组比较,EGF可以显著保护5-FU损伤的OP9细胞,使其存活率升高(P＜0.01).与空白对照组比较,模型组细胞早期凋亡率明显提高(P＜0.05),Caspase-3含量明显增加(P＜0.05),NO生成明显增多(P＜0.05),iNOS表达明显上升(P＜0.05);与模型组比较,实验组化疗损伤OP9细胞的早期凋亡率显著降低(P＜0.05),Caspase-3含量明显下降(P＜0.05),iNOS的表达明显受到抑制(P＜0.01),NO的生成明显减少(P＜0.05).结论 EGF可能通过降低Caspase-3含量抑制细胞凋亡,减少NO的过度生成,发挥其细胞保护作用.
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