高、低浓度金雀异黄素对Ishikawa细胞生长及ERα/ERβ蛋白比值的影响

来源 :北京中医药大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:onlywxx
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目的 研究高、低浓度金雀异黄素对雌激素受体(ER)阳性人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、集落形成及ERα/ERβ蛋白表达比值影响的差异.方法 以ER阳性人子宫内膜癌Ishikawa细胞为研究对象,正式实验前用Opti-MEM无酚红减血清培养基培养24 h,然后分为金雀异黄素低浓度组、高浓度组及溶剂对照组,依次加入由2%DCS-FBS的Opti-MEM无酚红减血清培养基配置所需浓度的金雀异黄素药液及含0.5‰DMSO的培养液.应用CCK-8法检测高浓度(10、25、50μmoL/L)和低浓度(0.001、0.01、0.1、1μmoL/L)的金雀异黄素干预Ishikawa细胞24、48、72 h对增殖的影响.平板集落形成实验检测高浓度(25、50μmoL/L)和低浓度(0.01、0.1μmoL/L)金雀异黄素干预1周对集落形成的影响.用Western blot法检测高浓度(25、50μmoL/L)和低浓度(0.01、0.1μmoL/L)金雀异黄素干预48 h后对ERα/ERβ蛋白表达比值的影响.结果 低浓度(0.001、0.01、0.1μmoL/L)范围内金雀异黄素促进Ishikawa细胞增殖,在干预48 h后最明显,0.1μmoL/L浓度促增殖作用达到最强(P<0.01);高浓度时(10、25、50μmoL/L)抑制细胞增殖(P<0.05),且呈时间和浓度的依赖性,50μmoL/L浓度下干预72 h后抑制作用达到最强(P<0.01).低浓度金雀异黄素的集落形成率分别为14.60%和15.13%,和溶剂对照组(12.20%)相比有统计学差异(P<0.05);高浓度集落形成率分别为6.07%、4.27%,显著低于溶剂对照组(P<0.01).高浓度和低浓度下ERα蛋白表达均上调,且在0.1μmoL/L时达到最高;ERβ蛋白表达均下降,在25、50μmoL/L时达到最低;ERα/ERβ蛋白比值均明显上调,在0.1μmoL/L时达到最高.结论 低浓度金雀异黄素具有促ER阳性Ishikawa细胞生长的作用,可能通过上调ERα/ERβ蛋白表达比值实现;高浓度金雀异黄素虽然也可以上调ERα/ERβ蛋白表达比值,但可能存在其他非ER依赖机制主导发挥抑制Ishikawa细胞生长的作用.
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