构建人基质金属蛋白酶1基因重组腺病毒载体及体外降解Ⅲ型胶原的检测

来源 :中国组织工程研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ljdoctor
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背景:基质金属蛋白酶1能够降解以Ⅰ型胶原为主的细胞外基质,有望逆转纤维化组织。目的:利用Gateway技术构建含人基质金属蛋白酶1基因的重组腺病毒载体,并观察其在体外降解Ⅲ型胶原蛋白的能力。方法:从携带人基质金属蛋白酶1基因片段的pcDNA3.1质粒中PCR扩增出人基质金属蛋白酶1基因片段,双酶切连接入门载体pENTERTM 1A形成入门克隆,利用LR反应与目的载体pJTITM R4 Dest CMV-N-EmGFP pA Vector同源重组构建表达克隆pAd- hMMP-1-eGFP。经PacⅠ酶切线
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