PRRSV变异株ORF6基因重组杆状病毒的构建及其在昆虫细胞的表达

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：eadead1981

【摘要】

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参照GenBank中登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)XH-GD株ORF6(M蛋白)基因序列,设计合成了一对引物,扩增PRRSV ORF6基因.将该基因克隆于转移质粒载体pFcDNA3.1(+)中,获得重

【作者】

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曹宗喜潘全会齐岩孔留五何逸民罗玉均秦宏阳张翔峰张得玉张桂红

【机构】

：

华南农业大学,兽医学院,广东,广州,510642农业部动物疫病防控重点开放实验室,广东,广州,510642;美国礼来,亚洲,公司动物保健处,上海,200021;

【出处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2009年4期

【关键词】

：

PRRSV 杆状病毒表达克隆

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参照GenBank中登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)XH-GD株ORF6(M蛋白)基因序列,设计合成了一对引物,扩增PRRSV ORF6基因.将该基因克隆于转移质粒载体pFcDNA3.1(+)中,获得重组转移质粒pFcDNA3.1-ORF6并将其转化DH10Bac细胞,得到重组穿梭质粒Bacmid-ORF6,再将其转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒rBacmid-ORF6,经PCR鉴定证实目的基因正确地插入到杆状病毒基因组的CMV启动子下游;经过问接免疫荧光试验(IFA)检测,M蛋白在SD细胞中得到了表达,而且表达的产物具有特异免疫学反应性.

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