反相液相色谱对多肽的分离、纯化与制备

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用反相高效液相色谱(RPLC)对两种化学合成多肽--32肽和21肽进行了分离、纯化和制备.在用分析型RPLC色谱柱对多肽样品的制备过程中,对其进样量和洗脱梯度进行了选择.每次进样量为5mg,在最优化色谱条件下,用RPLC一步就可对21肽进行分离纯化,其纯度达到98.6%.而32肽由于样品组分更加复杂,RPLC一步纯化后其纯度仅有80%.通过对色谱分离条件的再次优化,对32肽进行二次分离纯化,纯度达到96.4%.在其最优化条件下,通过多次样品收集和冷冻干燥,分别制备了高纯度的21肽和32肽各100 mg.
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