人NKG2D真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的瞬时表达

来源 :湖南医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wuliaocanglang

【摘要】

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目的: 构建人NKG2D重组真核表达载体,并研究其在COS-7细胞中的表达.方法:应用RT-PCR,自健康人外周血单个核细胞(PBMC)中获取NKG2D cDNA,应用基因重组技术构建含目的基因的T载

【作者】

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刘映霞胡国龄刘敏谭德明沙新平何淑雅

【机构】

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中南大学湘雅医院传染病研究所,南华大学附一医院神经外科,南华大学分子生物中心

【出处】

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湖南医科大学学报

【发表日期】

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2003年6期

【关键词】

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基因克隆 COS-7细胞基因表达 gene clone gene expression COS-7 cell

【基金项目】

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湖南省自然科学基金，湖南省卫生厅科研项目

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目的: 构建人NKG2D重组真核表达载体,并研究其在COS-7细胞中的表达.方法:应用RT-PCR,自健康人外周血单个核细胞(PBMC)中获取NKG2D cDNA,应用基因重组技术构建含目的基因的T载体克隆后,构建含目的基因的真核细胞表达质粒,并经酶切和测序证实.然后应用脂质体介导将重组真核表达质粒转染COS-7细胞,用RT-PCR和流式细胞术(FCM)检测转染细胞NKG2D表达.结果:重组真核表达载体中插入片段序列与GeneBank登录的cDNA序列一致.NKG2D在COS-7细胞中获得表达.结论:成功

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