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番茄Metacaspase基因（LeM）的克隆及其在大肠杆菌Rosetta中的高效表达

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wxhex2008

【摘 要】

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为获得可溶性的番茄Metacaspase蛋白,后续研究Metacaspase蛋白的酶学特性以及功能,利用RT-PCR方法克隆了番茄（Lycopersicon esculentum）中Metacaspase（LeM）全长cDNA,并成功地构建

【作 者】

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马秋敏 张雅丽 刘金娜 车英慧 谢寒丁 罗云波 曲桂芹 

【机 构】

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中国农业大学食品科学与营养工程学院食品生物技术实验室

【出 处】

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农业生物技术学报

【发表日期】

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2011年2期

【关键词】

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番茄 METACASPASE 基因克隆 原核表达 Lycopersicon esculentum  Metacaspase  Gene cloning  Pro 

【基金项目】

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中央高校基本科研业务费专项资金（No.2009-1-83）, 国家公益性行业（农业）科研专项（No.200803033-B0602-03）, 国家自然科学基金（No.30500352）共同资助

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为获得可溶性的番茄Metacaspase蛋白,后续研究Metacaspase蛋白的酶学特性以及功能,利用RT-PCR方法克隆了番茄（Lycopersicon esculentum）中Metacaspase（LeM）全长cDNA,并成功地构建了LeM基因的原核表达载体重组质粒pET28a-LeM,转入大肠杆菌（Escherichia coli）BL21（DE3）PlysS和Rosetta中进行诱导表达,并对诱导表达条件进行了优化。SDS-PAGE结果显示,在37℃条件下,1mmol/L IPTG诱导表达量最

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