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目的
探索丝素蛋白(SF)、壳聚糖(CS)和纳米羟基磷灰石(nHA)制备骨、软骨梯度孔径支架方法及可行性。
方法制备浓度为2%的SF和CS溶液及nHA悬液,三者等比例混合,采用离心-冷冻干燥法及化学交联法制备SF/CS/nHA骨、软骨梯度孔径支架,检测支架孔隙率、热水溶失率、吸水膨胀率及力学性能,绘制溶失曲线及应力-应变曲线,采用扫描电镜(SEM)观察支架内部结构及形态并测量支架孔径大小。
结果SF/CS/nHA骨、软骨梯度孔径支架孔隙率为(91.30±3.35)%,5周后热水溶失率为(16.57±3.18)%,吸水膨胀率为(3218.53±84.37)%,力学检测结果显示支架抗压性能良好。SEM显示支架内部孔隙呈蜂窝状、相互交通,孔隙分布从上到下逐渐密集,孔径大小从上至下逐渐减小,分别为(141.11±11.85)μm、(119.94±9.05)μm、(93.10±14.98)μm、(79.95±8.65)μm,各层互相比较差异有统计学意义(F=22.973,P=0.000)。支架细胞毒性检测结果显示各个时间段浸提液组A值与阴性对照组相比差异均无统计学意义(t24 h=0.520,P=0.610;t48 h=0.665,P=0.515;t72 h=0.439,P=0.666),细胞相对增殖率(RGR)值均大于100%。
结论利用离心-冷冻干燥法及化学交联法可初步制备SF/CS/nHA骨、软骨梯度孔径支架。支架呈三维立体结构、渐进的梯度式孔径、高孔隙率、极强的吸水性、适宜的降解速率及良好的抗压性能,支架无明显细胞毒性,细胞相容性良好,基本符合骨组织工程材料的要求。