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目的 :探讨骨碎补总黄酮对大鼠腱骨愈合的作用及相关分子机制。方法 :选取10只8周龄雄性SD大鼠(体重180~220 g),培养原代跟腱干细胞,取第3代跟腱干细胞用于实验。向大鼠跟腱干细胞中加入不同浓度(0、0.1、1、10 ng/ml)骨碎补总黄酮处理,14 d后分别检测ALP、Runx2、OCN、VEGF、P-S6和P-4E/BP1表达的变化。选取40只8周龄的雄性SD大鼠(体重180~220 g)行大鼠关节外骨隧道-游离肌腱移植造模,术后随机分为实验组和对照组,实验组灌胃骨碎补总黄酮(100 mg·kg-1·d-1),对照组灌胃等量的生理盐水。分别于术后3、6周取材进行生物力学检测腱骨愈合强度,组织学切片观察腱骨愈合情况及新生血管数目。结果:不同浓度的骨碎补总黄酮处理后,ALP染色及活性指标检测提示0 ng/ml组(0.55±0.11)、0.1 ng/ml组(0.87±0.08)、1 ng/ml组(1.18±0.11)、10 ng/ml组(1.48±0.10),各组比较差异有统计学意义(P<0.05);体外培养14 d后提取细胞蛋白免疫印迹实验提示,随着骨碎补总黄酮浓度的增加,mTOR下游标记蛋白P-S6蛋白表达量逐渐增加(P<0.05),P-4E/BP1蛋白表达量逐渐减少(P<0.05),成骨相关蛋白Runx2、OCN,VEGF表达量逐渐增加(P<0.05)。生物力学检测显示术后3周时,对照组(0.51±0.02)N/mm和实验组(0.78±0.05)N/mm力学强度比较差异无统计学意义(P>0.05),而6周时实验组(1.36±0.09)N/mm的力学强度明显高于对照组(1.01±0.08)N/mm(P<0.05)。组织学结果显示实验组3周和6周时腱骨界面细胞成熟程度更高,Sharpey纤维生长更加密集,间质钙化程度更高,新骨和血管发生明显增多。结论:骨碎补总黄酮可以通过激活mTOR信号通路,促进肌腱干细胞的成骨分化,在活体可以加快腱骨愈合速度,提高腱骨愈合质量。