脂质体介导入钠/碘同向转运体基因转染肺癌A549细胞及其蛋白表达

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目的:研究人钠/碘同向转运体(NIS)基因转染肺癌细胞及其蛋白表达.方法:将体外培养的肺癌A549细胞分为实验组和对照两组:以脂质体Lipofectamine2000为载体,分别介导转染重组质粒pcDNA3-hNIS和空质粒pcDNA3.NIS基因重组质粒pcDNA3-hNIS进行扩增、纯化,并经酶切鉴定和DNA测序.采用Western Blot法和免疫组化法分别检测转染肺癌细胞中NIS蛋白表达.结果:酶切鉴定年:UDNA测序结果表明重组质粒pcDNA3-hNIS中插入的hNIS基因片段大小、方向正确.Western Blot法和免疫组化染色结果显示实验组有NIS蛋白表达,其阳性率达70.6%且主要分布于细胞膜而对照组无表达.两组比较有显著性差异(P=0.000).结论:脂质体Lipofectamine 2000介导转染人钠/碘同向转运体基因pcDAN3-hNIS肺癌细胞能够成功地表达MS蛋白.
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