高效液相色谱法测定钙片中酪蛋白磷酸肽的含量

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采用高效液相色谱(HPLC)法测定了5种钙片中酪蛋白磷酸肽(CPP)的含量。在流动相为水+1‰TFA(水相)和乙腈+1‰TFA(有机相),检测波长215 nm,流速1 mL/min,进样体积10μL下,通过HPLC色谱图分析,优选了梯度洗脱条件为有机相5%~35%,45 min。在此条件下,CPP分离效果良好,回收率介于96.75%~104.07%,比较接近真实值,说明这5种钙片中CPP添加效果良好。同时,结果也表明,HPLC法处理快速简便,准确度和灵敏度较高,检测限为6.81μg/mL,可作为检测钙片中CPP含量的优良方法。另外,为了将HPLC法与其他检测方法进行比较,还采用应用较普遍的钡-乙醇沉淀法对相同的5种钙片中的CPP含量进行了测定,结果表明,5种钙片样品中的CPP回收率均超过了220%,偏差较大,因而此法不宜作为钙片中CPP的检测方法。
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