目的了解艰难梭菌临床分离株对抗菌药物的耐药性及耐药机制。方法以琼脂稀释法测定甲硝唑等12种抗菌药物对2007年3月～2009年3月复旦大学附属华山医院临床分离的艰难梭菌的体外抗菌活性;PCR扩增及DNA测序比对检测耐药基因及耐药决定区突变。结果 188株菌株包括25种核糖型别,以核糖型017最为常见(25%),其次为001与012。未检测到核糖型027,但有1株细菌为核糖型078。所有菌株均对甲硝唑、万古霉素和哌拉西林-他唑巴坦敏感,对莫西沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、红霉素、克林霉素、四环素、利福平、利福昔明和夫西地酸的耐药率分别为50.0%、100%、70.7%、77.7%、83.0%、47.9%、19.8%、19.8%和12.8%。主要核糖型菌株耐药性更高。耐药株中耐药基因或耐药决定区突变检出率分别为:ermB基因76%;tetM基因97.8%;gyrA基因突变59.6%;g了rB基因突变11.7%;g了rA与gyrB基因同时突变28.7%;rpoB基因突变100%。仅在2株夫西地酸耐药株中检测到fusA基因突变。结论艰难梭菌对甲硝唑与万古霉素仍呈现敏感,但对氟喹诺酮类药物及红霉素等呈现较高的耐药率。核糖型017等流行株对莫西沙星、利福平等抗菌药物耐药率更高。