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目的 建立一种能够快速、灵敏、特异的鉴定结核分棱杆菌的实时荧光定量PCR (real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测方法.方法 根据结核分枝杆菌基因保守序列设计引物,并构建标准品.对确诊肺结核病人培养涂阳的结核痰液标本113份.正常人的痰液58份.戈登分枝杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯球菌、表皮葡萄球菌、肺炎链球菌痰液标本共计30份.应用SYBR Green实时荧光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法检测结核分棱杆菌.结果 SYBR Green实时荧光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法检测的特异性分别为99.1%、43.3%.结论 荧光定量PCR是一种能够快速、灵敏度高、特异性强的结核分校杆菌辅助诊断方法,具有重要的应用价值.