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目的
研究卡瓦胡椒素B对急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞增殖、凋亡的作用及机制。
方法用不同浓度卡瓦胡椒素B处理T-ALL细胞株CEM-C7(糖皮质激素敏感)及MOLT-4(糖皮质激素耐药)细胞后,通过3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(MTS)法观察卡瓦胡椒素B对CEM-C7及MOLT-4细胞生长速度和倍增时间的影响,通过流式细胞术检测卡瓦胡椒素B对CEM-C7及MOLT-4细胞凋亡的影响,通过Western blot方法检测Bim、Bcl-2、活化型Caspase-9的表达。用不同浓度卡瓦胡椒素B处理T-ALL患儿标本后通过Western blot方法检测Bim和Bcl-2的表达。
结果MTS结果显示:卡瓦胡椒素B显著抑制T-ALL细胞株的增殖,呈剂量和时间依赖性(P<0.01)。流式细胞术检测凋亡结果显示:卡瓦胡椒素B显著诱导T-ALL细胞株凋亡,呈剂量依赖性(P<0.001)。Western blot结果显示:卡瓦胡椒素B在T-ALL细胞中增加活化型Caspase-9及Bim的表达,降低Bcl-2的表达,在T-ALL患儿标本中增加Bim的表达,降低Bcl-2的表达,均呈剂量依赖性。
结论卡瓦胡椒素B能够显著抑制T-ALL细胞株的增殖,诱导其凋亡,卡瓦胡椒素B可能是通过上调Bim的表达及下调Bcl-2的表达,激活Caspase-9而起抗癌作用,且与是否糖皮质激素耐药无关。