【摘 要】
：
近年来随着纤维素酶在食品加工工业中具有广阔应用前景,而纤维素酶的工业应用一直受酶活性低,成本高的限制.为了提高中性内切葡聚糖酶的活性,作者利用易错PCR技术对来自枯草
论文部分内容阅读
近年来随着纤维素酶在食品加工工业中具有广阔应用前景,而纤维素酶的工业应用一直受酶活性低,成本高的限制.为了提高中性内切葡聚糖酶的活性,作者利用易错PCR技术对来自枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)C-36的内切葡聚糖酶基因进行定向进化研究,构建了在大肠杆菌中的突变体库.通过刚果红平板筛选,获得了酶活性提高的突变株F-1O,活力比亲本酶提高4.2倍.序列分析表明:F-10有5个碱基发生突变,两个氨基酸突变:D212V和T307S.SDSPAGE条带,表明基因表达正确,而表达量较原始菌株显著增加.酶学性质分析,表明该酶的最适反应pH为5.6,最适反应温度为45℃,在pH 4.5～10.0范围内50℃保温30 min可保持80％的剩余酶活,在60～75℃酶活力相对稳定,可保持在最高酶活的80％以上,当温度高于75℃时,酶开始变性失活,酶活力迅速下降.研究获得了酶活性提高的内切葡聚糖酶菌株,为进一步在分子水平研究内切葡聚糖酶的功能和其应用打下了基础,也为高酶活酶分子在其他高表达系统的表达提供了基础材料.
其他文献
目的 探讨臭氧对帕金森病(PD)大鼠模型黑质氧化应激及凋亡相关蛋白表达的影响. 方法 SD大鼠32只按随机数字表法分为PD组、20 mg/L臭氧治疗组、50 mg/L臭氧治疗组和正常对照组
目的检测黏着斑蛋白(Kindlin-1)在肝细胞性肝癌(简称肝癌)中的表达,探讨其在肝癌转移中的临床意义。方法收集58例肝癌组织和癌旁组织及7例正常肝组织,采用免疫组化染色、West
大多数精神健康（自杀风险）评估的研究是在大专院校进行的，而将这些成果直接运用于全科医疗机构并不合适。许多报告显示，医务人员与自杀患者打交道非常困难。例如，在与自杀患者打交
目的 探讨不同相对分子质量的左旋(L-)多聚赖氨酸对新生鼠原代海马神经元生长的影响. 方法 采用针蕊挤压过网法制备游离新生鼠海马神经细胞悬液,将细胞分为3组,分别种植于未
目的研究氧化应激条件下中间纤维蛋白细胞角蛋白(cytokeratin)的抗凋亡作用。方法利用RNA干扰(RNAi)技术敲低细胞内细胞角蛋白18(CK18)的表达,免疫印迹法检测细胞角蛋白的表
目的 筛选链霉菌宿主并异源表达环肽YM-216391,为组合生物合成新化合物等后续研究奠定基础.方法 将包含YM-216391合成整个基因簇的黏粒导入不同的链霉菌中,分析不同宿主YM-21
目的建立乙酰肝素酶可变剪接体Splice 5稳定转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株,并进行亚细胞定位分析。方法将表达乙酰肝素酶全长的质粒和乙酰肝素酶可变剪接体Splice 5质粒转染入
图（或复杂网络）是大规模代谢网络研究的重要工具。传统上，主要使用代谢物图研究代谢网络，特别是人类的代谢网络。本文则使用反应图来研究人类的代谢网络，即：如果反应X的某个代谢产
目的 建立一种poly(U)加尾RT-PCR检测微RNA(microRNA,miRNA)分子的新方法.方法 提取细胞总RNA,用poly(U)聚合酶在miRNA 3′端添加U尾,逆转录为cDNA,实时定量PCR检测miRNA分子
采用包埋法对重组大肠杆菌E.coli BL21进行了固定化研究,确定海藻酸钙是较好的固定化载体.考察了海藻酸钠质量分数、CaCl2质量分数、钙化时间、细胞包埋量以及固定化颗粒直径