HEK293细胞中CDK1O蛋白复合体的分离纯化

来源 :四川大学学报（自然科学版） | 被引量 : 0次 | 上传用户：iamvp

【摘要】

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通过半定量RT-PCR (reverse transcriptase PCR)检测了CDK10在人胚胎肾细胞(HEK293)、人宫颈癌细胞(HeLa)、人乳腺癌细胞(MCF7)中的表达水平,克隆并构建了全长CDK10基因的真

【作者】

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赵长宏陈斌吴传芳欧阳劲秦岭

【机构】

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四川大学生命科学学院,成都,610064成都南诺格生物科技有限责任公司,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都610064;成都华高瑞甜科技有限公司,成都610064;

【出处】

：

四川大学学报（自然科学版）

【发表日期】

：

2013年1期

【关键词】

：

CDK10 蛋白纯化细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶银染

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通过半定量RT-PCR (reverse transcriptase PCR)检测了CDK10在人胚胎肾细胞(HEK293)、人宫颈癌细胞(HeLa)、人乳腺癌细胞(MCF7)中的表达水平,克隆并构建了全长CDK10基因的真核表达质粒.在HEK293中筛选得到了稳定表达CDK10-Flag的细胞系,大规模培养该细胞系,分离细胞核、细胞质提取物,在非变性条件下利用anti-Flag抗体免疫共沉淀(Immunopreeipitation,IP),银染及蛋白质免疫印迹检测结果表明分离到CDK10蛋白及与其可能结合的其它蛋白,为质谱(Mass Spectrum,MS)鉴定提供材料.

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