【摘 要】
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目的应用分子生物学技术对结核分枝杆菌重组抗原Rv3480c基因进行克隆、表达和纯化。方法以结核分枝杆菌标准菌株H37Rv基因组为模板,通过聚合酶链式反应（PCR）扩增,克隆Rv3480c基
【机 构】
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遵义医学院附属医院呼吸二科,山东省临沂市人民医院东医疗区内三科
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目的应用分子生物学技术对结核分枝杆菌重组抗原Rv3480c基因进行克隆、表达和纯化。方法以结核分枝杆菌标准菌株H37Rv基因组为模板,通过聚合酶链式反应（PCR）扩增,克隆Rv3480c基因片段,产物经验证后与载体质粒p ET28a连接重组质粒,将验证构建成功的重组质粒转化入表达宿主E.coli BL21（DE3）菌体内,经异丙基半乳糖苷（IPTG）诱导蛋白表达,溶解包涵体,并通过多次低温冻融、不同浓度尿素复性方法进行包涵体蛋白质的纯化。结果扩增后基因电泳试验及测序证实成功重组目的基因,用尿素溶液和磷酸盐
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