重组葡激酶突变体K35R纯化过程中宿主菌菌体蛋白残余量的免疫分析

来源 :河北师范大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sayaka66
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葡激酶突变体K35R(DGR)是双功能葡激酶突变体,是正在开发的治疗血栓性疾病的新药.为检测DGR纯化过程中宿主菌菌体蛋白的残留,建立了宿主菌菌体蛋白的免疫分析方法.用所制备的宿主菌菌体蛋白免疫新西兰兔,得到菌体蛋白的抗血清。使用SDS—PAGE和基于抗血清的免疫印迹方法检测DGR纯化过程中菌体蛋白的去除.进一步建立了对宿主菌菌体蛋白灵敏的酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,其检测线性范围是5-100μg/L,并用ELISA法定量测定了纯化过程中中间产物和纯化产品中菌体蛋白的含量.
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