【摘 要】
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目的探讨不同浓度马兜铃酸(AA)对肾小管上皮细胞(RTECs)毒性作用的差异,以及BMP-7对AA所诱导RTECs凋亡的保护作用。方法 (1)用浓度分别为5、10、20、40、80、160μg/mL AA刺
【机 构】
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广东医学院附属医院肾病研究所,湖南省株洲市第一人民医院肾内科
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目的探讨不同浓度马兜铃酸(AA)对肾小管上皮细胞(RTECs)毒性作用的差异,以及BMP-7对AA所诱导RTECs凋亡的保护作用。方法 (1)用浓度分别为5、10、20、40、80、160μg/mL AA刺激体外培养人近端肾小管上皮细胞株(HK-2细胞),应用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测不同浓度AA对HK-2细胞的直接毒性作用,相差显微镜观察细胞形态学改变,用Hoechst 33258染色法观察不同浓度AA诱导的HK-2细胞凋亡核形态的改变,计算细胞凋亡率;(2)用300 ng/mL BMP-7处理经AA(20和40μg/mL)诱导的HK-2细胞48 h,然后Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡率,分光光度法检测Caspase-3蛋白酶活性。结果当AA浓度达到80μg/mL时,细胞LDH释放率明显升高(P<0.001);而AA浓度为10μg/mL时,细胞凋亡率开始明显升高(P<0.001),AA浓度为40μg/mL时,细胞凋亡率最高;BMP-7处理后,细胞凋亡率和Caspase-3蛋白酶活性明显下降(P<0.01)。结论大剂量AA致RTECs坏死,中小剂量AA致RTECs凋亡;BMP-7可减轻AA诱导的RTECs凋亡,其作用可能部分通过抑制Caspase-3酶活性而实现。
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