【摘 要】
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根据已报道的猪细小病毒基因组序列，设计并合成了引物和探针，从猪细小病毒（PPV）感染的细胞中提取DNA，经PCR扩增，产物纯化后与pGEM—T—easy连接，转化大肠杆菌JM109，筛选后得到重组标
【机 构】
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河南农业大学牧医工程学院,河南省动物性食品安全重点实验室
【基金项目】
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国家“十五”食品安全重大攻关专项基金资助项目(2001BA804A30-11)
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根据已报道的猪细小病毒基因组序列，设计并合成了引物和探针，从猪细小病毒（PPV）感染的细胞中提取DNA，经PCR扩增，产物纯化后与pGEM—T—easy连接，转化大肠杆菌JM109，筛选后得到重组标准品质粒，对重组标准品质粒进行PCR和测序鉴定，表明目的片段已经成功克隆。将10^1～10^5拷贝反应的重组标准品质粒进行荧光定量PCR，系统自动分析软件显示Ct值与标准品浓度的对数之间存在良好的线性关系。动力学曲线分析表明，在该反应体系和反应条件下，标准曲线的灵敏度为10^2拷贝。本方法的建立为猪细小病毒感染
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