【摘 要】
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目的 探讨广州地区RhD变异型个体D抗原表位特征及基因突变遗传分子机制.方法 收集2019年1月～8月广州地区献血者及医院送检本中心做疑难RhD鉴定的RhD变异型标本59(人)份,用2种单克隆抗-D试剂及D-screen抗原表位检测试剂盒进一步分析D抗原表位的血清学特征,并做RhCE表型分型;采用QuickGene DNA提取试剂盒提取标本的基因组DNA,采用PCR-RFLP方法做RHD基因合子型分析;利用多重连接依赖探针扩增(MLPA)基因分型法做RHD基因型检测,并对仍存疑标本做RHD外显子(exon
【机 构】
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南方医科大学第一临床医学院,广东广州510515;广州血液中心临床输血研究所;广州血液中心临床输血研究所;南方医科大学第一临床医学院,广东广州510515
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目的 探讨广州地区RhD变异型个体D抗原表位特征及基因突变遗传分子机制.方法 收集2019年1月～8月广州地区献血者及医院送检本中心做疑难RhD鉴定的RhD变异型标本59(人)份,用2种单克隆抗-D试剂及D-screen抗原表位检测试剂盒进一步分析D抗原表位的血清学特征,并做RhCE表型分型;采用QuickGene DNA提取试剂盒提取标本的基因组DNA,采用PCR-RFLP方法做RHD基因合子型分析;利用多重连接依赖探针扩增(MLPA)基因分型法做RHD基因型检测,并对仍存疑标本做RHD外显子(exon1一exon10)Sanger测序,使用DNAS-tar/SeqMan软件做综合分析.结果 本组广州地区RhD变异型个体中,检出自献血者的占27.12％(16/59)[占同期广州中献血者比例0.007％(16/232793)],医院送检的患者疑难标本占72.88％ (43/59).RHD基因型检测:40.68％ (24/59)为RHD* weak partial 15、25.42％ (15/59)为RHD*DⅥ.3以及33.90％(20/59)较少见的RhD变异型类型[其中合并2种不同等位基因的RhD变异型又占76.92％(10/13)];血清学D-screen:RHD *DⅥ.3型细胞与抗-D(克隆号P3*21223B10)呈阳性反应,其他均为阴性的相对固定格局;RhD变异型CE表型分布比例为Ccee38.98％(23/59)、ccEe35.59％ (21/59)和CcEe25.42％(15/59).结论 弱D15和部分DⅥ.3为广州地区汉族人群最常见RhD烫异型类型,其中DⅥ可以通过D-screen等血清学方法得到初步鉴定,其他RhD变异型均需要分子生物学方法才能得到鉴定:＞95％RhD变异型均为C+或E+表型.
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