【摘 要】
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根据NCBI数据库中已知的蔷薇科植物花青素合成酶基因序列设计特异引物,从本实验室已经构建好的(捺)成熟果实均一化全长cDNA文库中筛选分离得到了一个编码花青素合成酶的cDNA:
【机 构】
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福建农林大学园艺产品贮存保鲜研究所
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根据NCBI数据库中已知的蔷薇科植物花青素合成酶基因序列设计特异引物,从本实验室已经构建好的(捺)成熟果实均一化全长cDNA文库中筛选分离得到了一个编码花青素合成酶的cDNA:基因命名为PsA NS,登录号:JN560957.该cDNA长1 478 bp,包含137 bp 5′非编码区,267 bp 3′非编码区,开放阅读框长度为1 074 bp.PsA NS编码358个氨基酸,分子量为40.41 ku,理论等电点为5.35.经BLAST分析对比发现,PsA NS氨基酸序列与甜樱桃、苹果和草莓的ANS氨基酸同源性都很高,分别为98％、93％和89％.将PsA NS亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1和pET-32a上,在大肠杆菌BL21中经1mmol/LITPG诱导表达获得了(捺)PsA NS融合表达蛋白,其分子量大小与预期的一致,进一步确认本试验克隆得到的PsA NS为(捺)花青素合成酶基因.
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